【產(chǎn)品名稱】
通用名：呼吸道六種病毒核酸檢測試劑盒（熒光 PCR 法）
【包裝規(guī)格】
貨號：A65324
規(guī)格：50 人份/盒。
【預期用途】
呼吸道腺病毒（Radv）、人偏肺病毒（HMPV）、人鼻病毒（HRV）、
呼吸道合胞病毒（RSV）核酸的定性檢測，用于呼吸道副流感
病毒Ⅰ/Ⅲ型（PIVⅠ/Ⅲ）、呼吸道腺病毒（Radv）、人偏肺病毒
（HMPV）、人鼻病毒（HRV）、呼吸道合胞病毒（RSV）感染
的輔助診斷及流行病學監(jiān)控。
【檢測原理】
本試劑盒根據(jù)熒光 PCR 技術(shù)原理，針對呼吸道副流感病
毒Ⅰ/Ⅲ型（PIVⅠ/Ⅲ）、呼吸道腺病毒（Radv）、人偏肺病毒
（HMPV）、人鼻病毒（HRV）、呼吸道合胞病毒（RSV）設計
特異性引物和 Taqman 探針，通過熒光定量 PCR 儀進行擴增，
從而實現(xiàn)對呼吸道副流感病毒Ⅰ/Ⅲ型（PIVⅠ/Ⅲ）、呼吸道腺
病毒（Radv）、人偏肺病毒（HMPV）、人鼻病毒（HRV）、呼
吸道合胞病毒（RSV）核酸的檢測。
【主要組成成分】
【儲存條件及有效期】
1．避光-20±5℃儲存，有效期 12 個月。
2．采用泡沫箱加冰袋的運輸方式，運輸不超過 4 天；開封
后避光-20±5℃儲存；反復凍融不超過 6 次。
3．生產(chǎn)日期、有效期至：見外包裝盒。
【適用儀器】
適 用 于 ABI 7500 、 Bio-Rad CFX96 、 Roche
Lightcycler480I、Lightcycler480II、cobas Z480、宏
石 SLAN-96S、SLAN-96P 等實時熒光定量 PCR 儀。
【樣本要求】
1．樣本類型：上呼吸道標本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽
抽取物、深咳痰液）；下呼吸道標本（包括呼吸道抽取
物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、肺組織活檢標本）；
組織培養(yǎng)物等樣品。
2．保存條件：采集的樣本應及時送檢，24 小時內(nèi)檢測的
應 4℃保存，超過 24 小時的-70℃保存（如無-70℃保存
條件，待測樣本可于-20℃冰箱保存 10 天），并避免反
復凍融。
【檢測方法】
1．試劑準備（試劑準備區(qū)）
將試劑盒各組分室溫融化，充分振蕩混勻后瞬時離心。
計算試劑使用份數(shù) N（N=樣本數(shù)+1<陽性對照>+1<陰性對
照>），根據(jù)下表配置反應體系，將各組分加入至同一適當
體積離心管中，充分混勻后瞬時離心，配制成反應體系混
合液，按 20μL/孔分裝至 PCR 反應管/板，并轉(zhuǎn)移至樣本處
理區(qū)。
2．樣本處理（樣本處理區(qū)）
① 核酸提取
選擇合適的核酸提取試劑盒提取樣本核酸，具體按照
相應的試劑盒說明書操作。
② 加樣
在已加入反應體系混合液的 PCR 反應管/板上分別加
入處理好的待檢樣本核酸、陰性對照、陽性對照各 5μL，
終體積為 25μL。蓋緊管蓋或封膜，瞬時離心后置熒光 PCR
擴增儀上檢測。
3．擴增檢測（核酸擴增區(qū)）
*步驟③中 55℃時熒光檢測，檢測通道為 FAM、VIC/HEX、CY5。
*ABI 系列熒光 PCR 儀不選 ROX 校正，淬滅基團選 None。
4．結(jié)果分析
根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)起止值，（建議起始設在 3～15、
終止設在 5～20，同時調(diào)整陰性對照的擴增曲線平直或低于
閾值線），點擊分析，在報告界面查看結(jié)果。
【質(zhì)量控制】
1．陰性對照：Ct 值＞38 或未檢出。
2．陽性對照：擴增曲線呈典型 S 型，且 Ct 值≤35。
3．同一實驗以上要求需同時滿足，否則本次實驗視為無效。
【結(jié)果判讀】
①陽性判讀：
A 管陽性判讀：
a：FAM 通道 Ct≤35，副流感 I 型病毒陽性；
b：VIC 通道 Ct≤35，呼吸道腺病毒陽性；
c：CY5 通道 Ct≤35，人偏肺病毒陽性；
B 管陽性判讀：
a：FAM 通道 Ct≤35，人鼻病毒陽性；
b：VIC 通道 Ct≤35，副流感病毒Ⅲ型陽性；
c：CY5 通道 Ct≤35，呼吸道合胞病毒陽性；
②陰性判讀：FAM 通道或 VIC 通道或 CY5 通道 Ct 值＞38
或未檢出，判為陰性。
③復測：
FAM 通道或 VIC 通道或 CY5 通道 35＜Ct 值≤38，
需復檢；復檢結(jié)果若一致，判定結(jié)果為陽性。
【檢驗方法的局限性】
1． 樣品采集、運輸、保存不當，試劑運輸、保存、配制不當都可
能會影響實驗結(jié)果，甚至會導致假陰性結(jié)果。
2． 如果實驗室污染、試劑污染、樣品交叉污染，可能出現(xiàn)假陽性
結(jié)果。
【試劑盒性能指標】
1． 最低檢測限：500copies/mL。
2． 特異性：針對可能與檢測靶標產(chǎn)生交叉的其他病原無交叉反應。
【注意事項】
1． PCR 操作各階段應嚴格分區(qū)操作，避免交叉污染。
2． 試劑盒各組分使用前應充分融化混勻，離心數(shù)秒后使用。
3． 各組分不得與其他產(chǎn)品或不同批號的相應成分進行互換。
4． 待測標本若不及時檢測，應保存于-70℃。
5． 樣品的處理應該嚴格按照生物安全規(guī)范操作。
6． PCR 操作人員應具有經(jīng)驗和受過專業(yè)培訓。
7． 本試劑盒僅用于科研使用，不做為臨床診斷使用。
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資料/datasheet
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